ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ


ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ
ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ, искусственные среды того или иного состава, предназначенные для культивирования микробов и простейших в лабораторных условиях. Впервые были введены для изолирования отдельных видов бактерий Р. Кохом в 1881 году, что создало базу для всей современной микробиологии и способствовало ее быстрому расцвету. Значение П. с. огромно: благодаря применению их имеется возможность не только выделить микроб в чистом виде, но и постоянно поддерживать его в культуре, в лаборатории, что облегчает его всестороннее изучение. Каждый микроб из числа изученных до наст, времени способен жить и размножаться в искусственных условиях на соответствующих П. с. Важное значение имеет реакция П. с. Рост и размножение микробов возможны при определенной кислотности (resp. щелочности) среды, пределы которой для большинства видов микробов довольно узки. Эта реакция П. с. устанавливается путем колориметрическим, электрометрическим или титрованием. Широко употреблявшиеся раньше в качестве индикатора лакмус и фенолфталеин вытесняются в наст, время другими, более чувствительными индикаторами, связаннцми с методом определения концентрации водородных ионов в среде. Для установления реакции П. с. по лакмусу испытывают ее на лакмусовую бумажку, синюю или красную, затем отмеривают 10 еж3 среды в пробирку и, если реакция среды по лакмусу была кислой, то приливают в пробирку из бюретки столько п/-ного раствора углекислой соды, чтобы капля жидкости, нанесенная на красную бумажку, вызвала лишь легкое посинение ее, т. е. чтобы реакция была нейтральной. Количество раствора соды, пошедшее для подщелачивания 10 ом3 среды, перечисляют на общее количество среды и добавляют к последней; среду нужно после этого прокипятить и еще раз проверить ее реакцию. При некотором ндвыке можно установить реакцию среды, осторожно добавляя к ней 10 %-ный раствор соды или нормальный раствор NaOH.—При употреблении в качестве индикатора фенол-фталеина нельзя подщелачивать П. с. раствором соды, т. к. фенолфталеин обесцвечивается под влиянием выделяющейся при нейтрализации СО, (фенолфталеин употребляется в 0,5%-ном растворе в 50°-ном спирте). В слабощелочной среде (рН=8) фенолфталеин вызывает бледнорозовую окраску среды, при дальнейшем подщелачивании — покраснение, при более кислой реакции фенолфталеин бесцветен. Титрование производится п/10-ным рас- 121 , ную воронку, простерилизованную и еще горячую , или через металлическую двойную воронку (содержащую между стенками горячую воду, см. Воронка, рис. 10 и 11). Можно фильтровать агар, поместив колбу и воронку в Кохов-ский аппарат (при 100°). Иногда приходится прибегать к одному из методов просветления, ' среди к-рых наиболее употребительно просвет^ ление куриным белком: неС 1 литр П. с. при 50° прибавляют белок одного яйда, тщательно разболтанный в 100 cms холодной воды, смешивают со средой и после нагревания ее отфильтровывают хлопья белка, которые захватывают все взвешенные в П. с. частицы. Разливаются П. с. в стеклянную бактериол. посуду, предварительно простерилизованную сухим жаром. Разливка производится при помощи стеклянной воронки, нижний конец которой соединен каучуковой трубкой со стеклянным наконечником: на трубку надевается зажим. Для разливки агара - воронка предварительно прогревается. Стерилизация П. с. Мясопептонный бульон и агар стерилизуются в автоклаве при 120° в течение 20—30 минут. Другие, П. с. не выдерживают сильного нагревания. Желатина стерилизуется текучим паром в аппарате Коха (см?. Коха аппарат) при 100° по 20—30 минут 3 дня подряд (дробная стерилизация). При применении. более высокой t° желатина теряет способность застывать при охлаждении. Среды с углеводами стерилизуются дробно текучим паром (3 дня подряд по 15 мин.), так как при более высокой темп, они легко изменяются. Некоторые среды (кровяная сыворотка) стери-' лизуются прогреванием при 56—-58° в течение 3 часов или фильтруются (для обеспложивания) через бактериальные фильтры (свечи), фильтры Зейца.—Готовые П. с. сохраняются в темном и прохладном месте, защищенном от пыли и высыхания. Лучше закрывать пробирки со средами (если они используются не сразу) резиновыми колпачками или заливать пробку парафином, а пробки колб накрывать бумажными покрышками. Свежие плотные П. с. обладают известной степенью влажности, что выражается между прочим в скоплении нек-рого количества «конденсационной» воды, образующейся при застывании, уплотнении, «конденсации» среды в нижних частях пробирки с плотной средой. Отсутствие конденсационной воды указывает на сухость среды. Сухие среды впервые предложены Дерром (Doerr, 1909). Обычным образом приготовленный агар разжижается, охлаждается до 50—-60° и разливается в большие сухие стерилизованные'чашки из прочного стекла. Агар высушивается в термостате при 37°; при разливке его тонким слоем высушивание происходит сравнительно быстро; через 12—20 часов питательная масса размельчается в порошок; среда хранится в металлической коробке. Перед употреблением порошок в определенном количестве смещивается с водой и нагревается в колбе. Сухие среды получаются путем высушивания и из жидких веществ. Приготовляются и сложные среды. В продаже имеются питательный агар, желатина, бульон, среды Дье-донне, Биттера, Эндо, Дригальского, Гаснера и др. Примеру Дерра последовали другие авторы, давшие свои рецепты приготовления сухих П. с. Так, Маркс (Marx) предложил заменять мясную воду Магги; исходя из этого, фирма Мерк приготовила рагит-агар, содержащий Магги, агар и цептон и представляющий соблй тонкий порошок; 42 г этого агара кипятится в воды в течение часа, затем фильтруется; получается среда, соответствующая 2%-ному агару. Прибавляя к 100 г обыкновенного агара или рагит-агара таблетку рагит-Эндо или ра-гит Дригальскогр, получают агар Эндо и Дри-гальского-Конра^и среду (см.); имеются также рагит Барзикова (таблетки) и другие. Сухие среды Пиорковского (бульон, агар, желатина) представляют собой порошки следующего состава: 1) бульон: сухого пептона 10 г, углекислого натрия 0,25 з, Магги 12 ^з; 2) агар-: порошка агара 20 г, сухого пептона 10 г, углекислого натрия 0,05 г и Магги 12 г; 3)   желатина: желатины 100 г, сухого пептона 10 г, углекислого натрия 0,05 г и Магги 12 г. Указанное количество взбалтывается в 1,л воды; смесь кипятится 1 час в Ко-ховском аппарате, фильтруется и стерилизуется. Кучинский и Фернер (Kuczynski, Ferner) предложили специальные сухие среды, поступившие в обращение под названием стандарт-I-бульон, стандарт-1-агар, стандарт-П-бульон и стандарт-П-агар (стандарты-1—для более и стандарты-П для менее прихотливых микробов) (фирма Мерк); способ приготовления составляет коммерческую тайну. Перед употреблением порошок растворяется в теплой воде и стерилизуется обычным способом; фильтрование излишне. Наконец Уленгут и Мессершмидт (Uhlenhuth, Messerschmidt) предложили пользоваться уже готовыми П. с, запаивая их в металлические коробки по типу консервов; преимущество таких консервированных сред в том, что в дополнительной обработке перед употреблением они не нуждаются. В СССР сухие П. с. изготовляются Институтом экспериментальной медицины в Ленинграде, но в широкую практику они пока не вошли.—Для выращивания микробов' применяются среды различного состава. Одни из них могут быть названы общими и употребляются в качестве ходовых в каждой лаборатории, другие имеют более специальное назначение и применяются для культивирования И диференцирования отдельных видов микробов. Общие П. с. могут быть по своему составу-разделены на белковые среды животного происхождения» (А), белковые, среды растительные . (Б) и среды безбёлковые (синтетические) (В). Наибольшим распространением пользуются белковые П. с, приготовляемые на мясе или его препаратах (экстракт и пр.).—А. Белковые среды. Главнейшей основой их является мясная вода и раствор пептона. Способы приготовления. 1) Мясная вода: мясо рогатого скота (для нек-рых целей лошадиное), очищенное от жира и сухожилий, пропущенное через мясорубку или мелко изрубленное, смешивается с двойным по весу количеством дест. или водопроводной воды, настаивается в течение 24 часов на холоду; затем жидкость пропускается через полотенце, остаток хорошо отжимается рукой или прессом. Мясной сок идет сейчас же на приготовление П. с. или для сохранения впрок стерилизуется в автоклаве при 120° в течение 20 минут, фильтруется, разливается по флаконам и снова стерилизуется. 2) 'О с н о в н о й раствор пептона: 100 г сухого пептона (Витте) и 50 з NaCl растворяются в 1 л дест. воды; затем прибавляется 1 г азотнокислого калия и 20 г кристаллической углекислой соды. 3) Основ но й раствор Готтингера (Hottitiger) получается путем переваривания мяса панкреатином и содержит высокоценные пептоны, полипептиды и аминокислоты. Среды, приготовленные на этом растворе, дешевле, так как к ним не нужно прибавлять дорогого пептона. Способ приготовления: 1 кг крупно нарезанного мяса опускают в 1,5 л кипящей воды, снова доводят до кипения, мясо вынимают и пропускают через мясорубку -По охлаждении. мясной отвар сливается в двухлитровую бутыль, прибавляется 1,5 г соды (Natr. carbon.), 3—5 г панкреатина (Рап-creatinum siccum) и 15 — 20 *г хлороформа (панкреатин можно заменить глицеринирован-ной поджелудочной железой). Содержимое бутыли хорошо встряхивается, в нее прибавляется измельченное мясо. Бутыль закрывают пробкой и хорошо встряхивают, придерживая пробку, чтобы ее не вытолкнули пары хлороформа. Оставляют при комнатной t° в течение 5 суток для переваривания (при 37°—2 дня), пока содержимое бутыли не превратится в прозрачную насыщенно желтого цвета жидкость с мелким осадком на дне; фильтрование, разливка, стерилизация при 120°—20 минут. 1. Мясные среды. 4) Агар м я с о -пептонный, см. Агар-агар. Агаровые среды употребляются для выращивания бактерий на плоскости и уколом (см. Микроорганизмы, культивирование микробов) в глубине агара (анаэробы). Для первой цели пробирки со све-же разлитым агаром укладываются под острым углом к плоскости для застывания агара в косом положении («косой» агар). Для посева уколом употребляется так наз. «прямой» агар„ застывший при прямом положении пробирки,. столбиком. 5) Агар глицериновый, 6)  Бульон глицериновы й, £м. ниже специальные среды для туб. бацил, № 1 и № 2. 7)  Бульон мясо-пептонный (см. Бульон): I л мясной воды,1 10 г пептона, 5 г NaCl. 8)  Б,у льон буферный:, вместо 5 г NaCl на 1 л мясной воды прибавляется 2-—3 г покупного фосфорнокислого натрия. 9) Бульон Либиховский (из Либиховского мясного экстракта): 10 г мясного экстракта, 10 г пептона. 5 г NaCl, 1 000 см3 дест. воды. Среды обычно несколько темнее, чем приготовленные на мясной воде, и несколько хуже для роста бактерий. Нек-рые экстракты могут содержать устойчивые споры и пептонизирующий фермент, что мешает свертыванию желатины, приготовленной на таком экстракте. 10) Бульон питательный Магги: 1 000 см3 дестилированной воды, 10 г мясного порошка Магги, 10 г пептона, 3 г NaCl. Кипятится 1 час в аппарате Коха. Остальное, как обычно. 11) Бульон Маг-t i п'а, применявшийся раньше почти исключительно для приготовления дифтерийного токсина, применяется теперь и для культивирования целого ряда микробов. Способ приготовления. а) Раствор пептона: из вымытых водопроводной водой и тонко измельченных свиных желудков (не менее 5) приготовляется следующая смесь, для самопереваривания: на 200 г кашицы 10 з чистой НС1 и 1 000 еж3 воды 50°. Оставляют в водяной бане (или в термостате) при 50° в течение 12—24 часов (при этой темп. пепсин переваривает ткани лучше, переводя их в пептон). В кислой среде бактерии не развиваются. Затем нагревание в автоклаве х/г часа при 100° (для разрушения пепсина), фильтрование через Сито, покрытое гигроскопической ватой, или через полотно. Перед тем как смешивать с мясной водой, раствор пептона по- 12» догревают до 80° и нейтрализуют, прибавляя 10%-ного едкого натра до легкого посинения красной лакмусовой бумаги (около 30 см3' на 1л). б) Мясная вода: 500 г изрубленного обезжиренного мяса (телятина) в 1 л воды настаивают в течение 20—24 часов (при 37°). Затем ' доводят t° до 50°, пропускают жидкость через полотно, отжимают и добавляют 5 г NaCl на' 1 л. Смешивают 500 г раствора пептона с 500 з мясной воды; подогревают до. 70° (в глиняной или фарфоровой посуде) в текучем паре; после нагревания пропускают через полотенце, доводят до нейтральной реакции, прибавляя на 1 л жидкости 7 смй нормального раствора NaOH. Стерилизация в автоклаве 20 минут при 120°, фильтрование через бумагу, разливка, стерилизация при 100° 3 дня по 20 минут. 12) Бульон Готтингера: основной раствор Готтингера разводится дест. водой в 3,5—10 раз (в зависимости от рода микробов), прибавляется 0,7% NaCl и 0,1% К2НР04; кипятят, устанавливают реакцию, снова кипятят, фильтруют через бумажный фильтр, проверяют реакцию, разливают по пробиркам и стерилизуют в автоклаве (120°— 20 минут). 13) Желатина питательная, см. Желатина. 14) Пептонна я, вода: 1%-ный раствор пептона (для анаэробов 2%-ный) или разведенный 1 : 10 дест. водой основной раствор пептона. 15) Пептонная вода с углеводами (среда Гиса) применяется для изучения ферментации углеводов бактериями. Состав: 1%-ный раствор пептона+0,4—1% того или- иного углевода [ара-бинозы, ксилозы, рамнозы (груцпа пентоз); й-глюкозы, левулезы, галактозы (группа гек-соз); сахарозы, лактдзы, мальтозы, раффинозы (дисахариды); инулина, декстрина (полисахариды); глицерина, эритрита, адонита, маннита, дульцита, сорбита, инозита (многоатомные спирты)] и лакмусовой настойки до ясносинего окрашивания среды. Дробная стерилизация в текучем паре 3 дня подряд по 15 мин. 2. Среды с жидкостями организма. 16) Асцит-агар готовится, как серум-агар (см. ниже). 17) Асцит-бульон (асцитический бульон): стерильно взятая асци-тическая жидкость прибавляется к разлитому в пробирки стерильному слабощелочному бульону в отношении 1 : 2. Контроль на стерильность (жидкость можно предварительно про-стерилизовать прогреванием на водяной бане при 56° в течение 3 часов или профильтровать через свечу). 18) К р о в я н о й агар, см. Кровь—кровь как питательная среда. 19) К р о -вяной агарТальмана:к 5—10 см3 слабощелочного агара, расплавленного и охлажденного до 45°, прибавляется 5 капель крови человека; смешение осторожным встряхиванием. 20) Бульон с кровью: кГготовому бульону прибавляется стерильно дефибрини-рованная кровь (барана, кролика и пр.) в количестве 5-—10%. Контроль на. стерильность. 21) Кровяная сыворотка сверну-т а я: стерильно взятая кровь лошади, рогатого скота, человека, кролика отстаивается, сыворотка стерильно отсасывается со сгустка, разливается по пробиркам и свертывается в косом положении в специальном аппарате Коха при 75—80°. Проверка на' стерильность в термостате при 37° в течение 24-—48 часов. Может быть употреблена сыворотка человеческая, оставшаяся после реакции Вассермана и снятая стерильно со сгустков; предварительно прогреть 1—2 часа при 58° на водяной бане. 22) Серум-бульон (сывороточный бульон) широко применяется для культивирования стрептококков, пневмококков и др. 23) Серум У агар (сывороточный агар> готовится прибавлением, при соблюдении всех правил асептики, к готовому слабощелочному расплавленному и охлажденному до 45° стерильному агару, разлитому по пробиркам,. 11/4 объема стерильной сыворотки; скашивается; контроль на стерильность. 24) Молоко, 25) лакмусовое молоко, см. Молоко ■— молоко как питательная среда. 26) Ж е л ч ь, см. Желчь—желчь как питательная среда. В качестве белковых жидкостей могут быть использованы также стерильно взятые жидкости hydrocele, плевральная и пр. 3. Яичные среды, см. .ЯгЦа —яйца. как питательная среда, и ниже—специальные-среды для туб. бацил. Б. Среды растительного происхождения. 1. Картофельные среды, см. Картофель. 2. Дрожжевые-среды применяются для культивирования; грибков и требовательных бактерий (вместо серум-бульона); в последнее время удачно применены нек-рыми ин-тами СССР для приготовления вакцин (кишечно-тифозной группы) в= качестве заменяющих мясные среды и дающих. хороший выход микробов. 27) Бульон с дрожжевым э*к страктом (вместо серум-бульона для требовательных бактерий):: 100 в пивных дрожжей размешиваются в-400 см3 дест. воды, подкисленной до рН—4,5, и кипятятся на огне через сетку при постоянном помешивании (10 минут). "После центрифугирования прозрачная жидкость разливается в колбочки и стерилизуется в текучем паре-или на водяной бане не более 10 минут. Этот-экстракт прибавляется к мясному бульону в.-количестве 5—10%. 28) Д р ожжевойагар для грибков: пивные дрожжи стерилизуются 1 час в Коховском аппарате и отстаиваются; к светлому фильтрату прибавляется-2% агара, он кипятится 1 час в Коховском аппарате, разливается по колбам и пробиркам1-и стерилизуется в автоклаве обычным образом. 29)  Дрожжевой регенерирован-ныйагардлявакцины:30д жидких пивных дрожжей, 60 л промытого ре/енериро-ванного агара, 150"г NaCl, 600 г сухого агара, кипятятся в автоклаве 30 мин. при 1 атмосфере. 30)  Трагакант'овая среда разработана в 1930 г. лаборанткой Замковой (Москва)» в качестве частично заменяющей дефицитный-агар-агар: 20 г трагаканта+500 см3 воды оставляется на сутки для- разбухания, затем— фильтрование через марлю. На 1 л разбухшего-трагаканта берут 10 г сухого агара, дальнейшее,. как обычный мясо-пептонный агар. 31) Соевые сред ы—см. Соя. В. Безбелковые'среды (синтетические) введены в бактериологич. технику еще со-времен Пастера, к-рый отметил, что дрожжи и? бактерии могут использовать азот аммиака. Кон (F. Colm) дал дальнейшую модификацию,. так наз. «нормальный питательный раствор для бактерий» следующего состава: 0,1 г фосфорнокислого калия, 0,1 г кристаллической сернокислой магнезии, 0,1 г трехосновной фосфорнокислой извести, 20 см3 дест. воды и. 0,2 г виннокислого аммония (источник азота-—аммоний и углерода—винная к-та).—В настоящее время существует ряд синтетических сред, пригодных для выращивания бактерий (см. табл.). 127                               .                                               ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ                                                                               128 Аспарагин и аспарагиновокислый аммоний в них являются главными источниками азота. Стерилизация текучим паром в пробирках (3 дня подряд по 15—25 мин.). Синтетические среды особенно охотно применяются для культивирования туб. бацил (см.. ниже). Галимар и Лаком (Galimard, Lacomme) прибавляют мочевину или.другие амины (аргднин, лейцин, тирозин, гликоколь) к раствору^ Содержащему 0,5% NaCl, 0,05% сернокислой магнезии, 0,2% глицерофосфорнокислой извести, 1,5% глицерина и углекислый калий до слабощелочной реакции.—Плотные безбелковые среды введены в практику Виноградским и Сулливаном. Безбелковая среда Роле.на (Raulin): 1 500 cms воды, 70 8 тростникового сахара, 4 з виннокаменной к-ты, 0,4 г азотнокислого аммония, 0,6 г фосфорнокислого аммония, .0,6 г углекислого калия, 0,4 з углекислого магния, ■0,25 г сернокислого аммония, 0,07 г сернокислого железа, 0,07 г. сернокислого цинка, 0,07 г кремнекислого калия, 0, 07 г углекислого марганца.                             ' Специальные П. с, или среды особого назначения, применяются для выделения и культивирования определенного вида бактерий (но и другие бактерии могут на них хорошо расти). Среды,,на к-рых развивается только или почти исключительно определенный вид микробов, носят название элективных. Многие специальные среды применяются как диферен-циально-диагностические. I. Специальные среды для выращивания и диференцирования туберкулезных бацил. 1) А г а р глицерин о-в ы й—обычного приготовления мясо-пептон-ный агар с 4—5% глицерина. 2) Бульон глицериновый, обычного приготовления мясо-пептонный бульон (1% пептона и 0,5% NaCl) с 3—5% чистого глицерина; рН=6,8— 7,2 (применяется для массового получения туберкулина путем посева кусочка пленки туб. культуры на поверхность)'. 3) Бульон глицериновый Марморека: 0,5 кг телячьей •селезенки настаивается в 1 л воды 24 часа, кипятится 10 минут на голом огне, фильтруется, прибавляется 1 % пептона Шапото (Chapo-teau) и 0,5% NaCl (или одноосновного фосфорнокислого калия), фильтруется, устанавливается слабощелочная реакция 10%-ным раствором, соды, кипятится 25 минут в автоклаве, ■фильтруется, прибавляется 2—3% глицерина, разливается по колбам, стерилизуется в автоклаве при 115°. 4) Буль он г л и ц.е р и - новый Иохмана (Jochmann): к 3%-ному глицериновому бульону добавляется 5% питательного средства Гейдена (Heiden), стерилизация в текучем паре. 5) Картофель глицериновый по Анци-лотти (Anzilotti): клинья картофеля варятту ся в 6%-ном растворе глицерина (подщелоченном 1 %-ным раствором углекислого натрия) около 2 минут. При изменении при этом 'реакции жидкость снова подщелачивается. Клиньявкладываются в1 -пробирки Ру, в расширения которых до перетяжки наливается 6%-ный глицериновый бульон или 5— 6%-ная глицериновая вода. Стерилизация в автоклаве 20 мин. при 120°. 6) Картофель глицериновый по Павловскому (способ приготовления, см. Картофель); особого щелочения не требуется. 7) К а р т о ф е л ь с желчью (по Кальмету и Герену) готовится, как глицериновый картофель. Ломтики картофеля кладутся в стерильную бычью желчь с 5% глицерина и нагреваются на водяцой бане при 75° в течение 3 часов, затем переносятся в пробирки Ру, в к-рые наливают до перетяжки 5 %-ную глицёринированну ю стерильную желчь. Стерилизация 30 мин. при 120°. На э,той среде рост туб. бацил (typ. bovin.) обильный, влажный. 8) Картофель по Э с м а р х у (V. Es-march): круглые ломти картофеля (очищенного и вымытого) в 1 см толщиной и 4—5 см в диаметре помещаются в стеклянные двойные i чашки. Стерилизация в текучем паре. {^Картофельный бульон Водремера: 500,0 очищенного картофеля варится в 1 л воды, фильтруется. Установка нейтральной реакции (содой) по\лакмусу. Стерилизация а/2 часа при 120°; выдерживание 24 часа в термостате, декантация, снова стерилизация (применяется гл. обр. для изучения некислотоупорных рас туб. бацил). 10) Картофельный бульон Цехновицера — как предыдущий, с прибавкой 4—5% глицерина. 11) Картофельный бульон Юревича: тертый картофель заливают, двойным количеством воды, оставляют на сутки на холоду, встряхивают, отжимают через полотно. Отстаивают полчаса, сливают; к сливу добавляют равное количество мясной воды,1 /2% пептона, 1ji% NaCl, кипятят 1 час, фильтруют. Прибавляют 3% глицерина, устанавливают щелочную реакцию, стерилизуют (74—Va часа) в автоклаве, фильтруют, снова стерилизуют. 12) Среда Кумба-ри и13)средаДепень (Despeignes)—см. Туберкулезные бацилы. 14) Мозговые среды Фиккера (Ficker): к мелко растертому свежему мозгу добавляют равный объем дестилированной воды, кипятят при постоянном помешивании 1/1 часа, пропускают через полотно, крепко отжимают, стерилизуют 2 часа под давлением. При прибавлении к мозговой кашице сыворотки ааи 3% глицерина (свертывание при соответствующей темп. в пробирках) получается плотная сывороточная мозговая среда; при прибавлении равной части 2,5%-ного агара и 3% Составные части Ушин-ского Вода........ Глицерин ..... Хлористый натрий К2НР04 ...... Молочнокисл, аммоний Аспарагиновокислый натрий ......... Аспарагин....... . Хлористый кальций . . Азотнокислый натрии . Сернокислая магнезия . Лимоннокислая магнезия ........... Углекислый аммоний . 1 000 смз 30,0—40,0 5,0 2,0—2,5 6,0—7,0 3,4 0,2—0,4 СуЛли-вана 1000 сиз 10,0 £,о 1.0 0,5 10,0 0,2 0,2 Френкеля Проскау-ера и Века Локер-мана 1 000 сиз 5,0 2,0 4,0 Раствора NaOH до пспо щелочной реакции 1 000 с«з 15,0 (КНаР04 1,3) 2,5 3,5 ■ 1 000 сиз 20,0 4,0 5,0 0,6 2,5 (NaH?,P04 3,0) глицерина—мозговой агар (мозговая кашица кислой реакции, не нейтрализовать). 15) Среда сливочная Иванова и Суени (Evanoif, Sweany) для диференцировки бацил typ. hum. и bovin.—см. Туберкулезные бацилы. 16) Среда Левенштейна с Kongoroth для выделения туб. палочек из крови—см. Туберкулег-мые бацилы. 17) VC p e д а Петраньяни (Pet-ragnani): картофельно-молочно-яичная среда •с прибавкой Malachitgrtin'a; хорошие результаты для выделения туберкулезных бацил (разница колоний различных типов туберк. бацил). 18) Яичная среда Безредка: жидкая •среда, состоящая из яиц и воды, подщелоченных 1%-ным раствором^углекислой соды (см. "Туберкулезные бацилы) .19) Яичная среда Дорсета (Dorset) (подготовка яиц—см. Яйца, яйца как питательная среда): содержимое яиц целиком выдувается в банку (с бусами), .прибавляется стерильная вода в количестве 10% по отношению к весу яиц, встряхивается до получения вполне гомогенной эмульсии (осторожно, чтобы не образовалась пена); •фильтруют через марлевую воронку (асептич-но), разливают по пробиркам. Свертывание при 70° в течение 2 часов, в наклонном положении, контроль на стерильность в термостате *(3 дня); сохранять под резиновыми колпачками. Среда особенно пригодна для выделения туб. ■бацил типа рогатого скота; человеческий тип на ней растет хуже. 20) Яичная среда .Л ю б е н а у (Lubenau): такой же способ приготовления (как среда Dorset), только берутся •одни желтки и вместо воды прибавляется равный объем 5%-ного глицеринового бульона нейтральной реакции (на 100 см3 бульона— Ъ—6 яиц); среда разливается по пробиркам, 'Свертывание в косом положении при 85—.90° ((ставить чашку с водой в аппарат);-хорошо ра--стет туберкулезная палочка человеческого ти-:па. 21) Яичная среда Петрова (все приготовление стерильно): 250 з свежей телятины или говядины, пропущенной через мясорубку, заливается равным количеством 5 %-ной глицериновой .воды, настаивается в течение ночи на леднике, фильтруется через стерильную 'марлю; 2 объема смеси белка и желтка тщательно смешать, профильтровать через стерильную шарлю, смешать с 1 объемом (на 400 ел3—200 <ди') мясной воды и на 100 ом3 этой среды при-••бавить 1 ем3 1%-ного спиртного раствора (95°) генцианвиолета. Хорошо смешивается и разливается по пробиркам. Свертывание в наклонном положении; первый день при 85°—30 минут; второй день при 75°—30 минут; третий .день при 75°—30 минут. Лиловый цвет среды выгодно выделяет растущие колонии; применяется для .выделения тубе ок. бацил из туберк. материала. Для пересевов применяется желтая -среда Пэтрова (того же состава, без краски). 22) Яичная среда Го н а' (Нопп): свежие ■яйца (очищенные, как в других методах) выпускаются целиком в банку с бусами, встряхиваются (без пены), переливаются в градуированный цилиндр; прибавляется J/3 объема 5%-ного глицеринового бульона (рН—6,2—6,4), смесь встряхивается, фильтруется через марлю, разливается в стерильные пробирки. Свертывание в косом положении, нагревая сначала на сильном огне до 80°, затем доводя на малом огне .до 87° и выдерживая при этой t° 30 мин. В каждую пробирку добавить после охлаждения •стерильно 0,8' см3 кислого бульона без глицери-ша (рН—6,2—-6,4), надеть колпачки (залить. парафином); проверка в термостате в течение 48 часов. Сохранение на леднике. Среда имеет большое применение для выделения- туб. бацил из материала. 23) Г. ематиновая среда Гон а—видоизменение предыдущей среды: к яйцам прибавляется 1/3 кислого 5%-ного глицеринового бульона и 3% раствора НЬ. Свертывание, как среды Гона. Хорошо растут палочки typ. bovin. 24) Свернутая кровяная сыворотка по Р. Коху, 25) свернутая сыворотка с 3% г)лицерина по Нокару и Ру (Nocard), способ приготовления—-см. Общие среды, № 21, Безбелковые среды для выращивания туб. бацил применяются с успехом. 26) Среда Сбтона (см. Бактерии—бацила Кальметт-Герена) дает хороший выход туб. бдцил, больший, чем на глицериновом бульоне; специально применяется Кадьметом для выращивания BCG. 27) Среда Лонга, 28) среда Моделя (см. Туберкулезные бацилы) применяются для приготовления безбелкового туберкулина. 29) Среда Левенштейна: 6 а фосфорнокислого аммония, 40 г глицерина, 1 000 см3 воды. 30) Среда М а с с о л я и Бретона (Massol, Breton): 1 л дест. воды, 1 з углекислой соды, 0,04 з сернокислого железа, 0,05 г сернокислой магнезии, 1 г фосфорнокислого калия, 8,5 г NaCl, 10 г глюкозы, 2заспарагина. 31) Среда Локермана, см. Общие среды—таблицу. 32) Среда Гей^ д е H-I/ е с с е (Heyden-Hesse): 5 з нутрозы Гей-дена растворяют в 50 см3 воды, затем добавляют 5 з NaCl, 30 см3 глицерина, 10—20 з агара, 5 см3 п/10 раствора соды и 950 см3 воды. Кипятят 15 минут, фильтруют, стерилизуют при 115°, разливают в чашки Петри. П. Специальные среды для дифтерийных бацил: 1) Бу л ь о н м я со-пептонный, рН = 7,3—7,6. 2) Л е ф л е-ровская сыворотка: классическая среда для дифтерийных бацил (элективная): 3 части сыворотки (телячьей или бараньей, можно и лошадиной) +1 часть нейтрализованного бульона с 1% глюкозы; свертывание среды при 90— 95°; стерилизация 3 дня подряд при 80° но 1 часу. 3)-Уплотненная кровяная сыворотка (лошади, человека, быка)— см. выше Общие среды, № 21. На обеих средах дифтерийные палочки растут быстро (8—12 часов при 37°), тогда как рост сапрофитов значительно отстает. 4) С реда Дригальско-го и Бираста (Bierast): к 600 см3 бычьей сыворотки- прибавляется 174 см3 бульона с 1 % глюкозы и 26 см3 чистой бычьей желчи, фильтруется, разливается по чашкам Петри и свертывается при 90—95°, затем стерилизуется три дня подряд по 1 часу при 80°. Быстрый рост дифтерийных бацил при первом засеве. 5) СредадеКоста, Труазье и Доверия (de Costa, Troisier, Dauvergne): 100 см3 лошадиной сыворотки, 10 см3 стерилизованного 30%-ного раствора глюкозы, 30 капель концентрированной стерильной лакмусовой настойки, 3 см3 раствора серной кислоты (10 г на 1000) стерильной; свертывается в чашках Петри при медленном повышении темп, до 80° (1 ч. 15 мин.). На этой среде колонии дифтерийных палочек—-красные, дифтероидов—-серовато-белые. 6) Среда Роте (Rothe); основана на том же принципе: 90 частей серум-бульона (4 части сыворотки быка+1 часть нейтрализованного бульона) смешивается с 10 частями лакмусовой настойки, содержащей 10% сахара (глюкозы или левулезы), свертывается, как обычно, в чашках Петри. 7)СредаТи-ля (Thiel): 1,0 г пептона, 1 г нутрозы, 1 з глюкозы, 0,5 г NaCl, 5 см3 лакмусовой настойки, 100 см3 воды; при росте на среде дифтерийной палочки происходит ферментация глюкозы (в отличие от псевдодифтерийных банил), вследствие чего—покраснение и свертывание среды. Теллуровые среды основаны на способности дифтерийных бацил редуцировать соли теллуровой к-ты, вследствие чего колонии дифтерийных бацил окрашиваются в черный и серо-черный цвет. 8) Теллуровая среда Бифалько (Bifalco): а) белок разводят в 3 частях воды с прибавлением-0,5&и3 раствора NaOH (1 : 10) и стерилизуют 15 минут при 115°; если хотят получить жидкую среду, то стерилизуют при 50—55° в водяной бане 3 дня подряд по 30 минут, б) Смешивают 75 см3 раствора белка, 25 см3 желтка и 2 см3 1%-ного стерильного раствора Kal. tellurosi. Нагревают 2 дня подряд по 30 минут при 50—55°, а на третий день свертывают. 9) Теллуровый агар Конрад и и Троша (Conradi, Troch):' 1%-ный сахарный (глюкоза) бульон [10 г мясного экстракта, 5 г NaCl, 20 г пептона Витте и 6 г Calc. bimalici (двуяблочный)] смешивается со свежей сывороткой быка в отношении 1 : 3; к 100 см3 смеси прибавляется 2 см3 1%-ного раствора теллуровокислого натрия; разливается по чашкам Петри, свертывается при 85°. Колонии дифтерийных палочек черные вследствие редукции теллура. 10) Теллуровая среда Перголы (Pergola): 50 см3 сыворотки, 50 см3 0,8%-ного раствора NaCl, 2 см3 1%-ного раствора теллуровокислого калия, 1 желток; свертывание в чашках Петри при 85—90°. 11) Г л и ц е- р и н о в ы й кровяной агар Мандельбаума и Гейне м а н а (Mandelbaum, Heinemann) с 5 % глицерина; поверхность смазывается стерильной человеческой, кровью; гемолиз—дифтерийные бацилы. 12) Среда Энгеринга (Engering) с олеиновокислым натрием для диференцирова--ния дифтерийных бацил; последние на этой среде не растут, дифтероиды дают хороший рост. К 20 см3 расплавленного агара прибавляется при сильном встряхивании 0,4 'см3 10%-ного раствора олеиновокислого натрия и разливается в чашки Петри. 13) Среды для получения дифтерийного токсина: а)  очищенное от жира и сухожилий мясо пропускается через мясорубку; 1 кг заливается 2 л воды, добавляются дрожжи, смесь ставится на ночь в теплое место. Сахар мяса пере-браживает и разлагается. Настой фильтруется через полотно, к нему добавляется 2% пептона Витте или Шапото и 5,0 г NaCl иди равная часть пептонного раствора, приготовленного по способу Мартена из свиных желудков. Среда стерилизуется 45 минут при 120°, фильтруется, нейтрализуется по лакмусу (рН=872—8,4); прибавляется кроме этого на 1 л 7 см3 нормального раствора соды, стерилизуется 20 мин. при 120°; фильтрование, разливка в плоские колбы тонким слоем (3 см). б)   1 л телячьей мясной воды, 20 г пептона, 3  г NaCl, 2-е Natr. phosph., несколько кусков мрамора или одна ложка мела, 1 г тростникового сахара (глюкозы). III. Специальные среды для ки-ш е ч н о-т ифозной группы имеют общий основной принцип: способность Bacterium coli разлагать некоторые углеводы, особенно лактозу, в противоположность тифозной палочке и другим патогенным микробам этой группы,. показателем чего является изменение цвета среды, содержащей тот или иной цветной индикатор (цветные среды); кроме того используются различные вещества, действующие задерживающим образом на сопутствующие бактерии, гл. обр. на Bact. coli. Пределы рН для тифозной палочки = 6,2—7,6; opt.—рН = 6,8— 7,2. 1) Среда Конрад и-Д ригальс кого— см. Дригалъского-Конради среда, а) Модификация: 100 см3 мясопептонного агара (2—3%-ного), 1,5 г молочного сахара, 5 см3' лакмусовой настойки, 1 см3 1°/00-пото раствора Krystallviolett В. Hochst б) На 2 л мясной воды 20 г пептона Витте, 10 г NaCl, 20 г нутрозы, 60. г агара, 300 см3 лакмусовой настойки, 30 г лактозы, 20 см3 1°/00-ного раствора водного Krystallviolett'а. Тифозная палочка, бацилы паратифа, дизентерии дают бесцветные или голубоватые колонии, кишечная палочка-^-красйые. 2) Среда Эндо, (Endo): 1 000 см3 мясопептонного (3 %-ного) агара, рН 7,5; 15,0 г молочного сахара (химически чистого), 5 см3 спиртового насыщенного р'аствора фуксина, 25 см3 10%-ного водного раствора Natr. sulfu-rosi (серноватистокислого натрия). Среда.должна сохраняться в темноте. Колонии тифозной_ палочки, паратифа и дизентерии через 24 часа' бесцветны,-через 48 часов—розовые; колонии. Bact. coli через 15 часов розовые в центре, через 24 часа—красные. Среда Эндо вместе с предыдущими наиболее употребительна для тифозно-кишечной группы. 3) Кофеин-ф у к'с и н-а гар Гетгенса (Gaehtgens)— агар Эндо с прибавлением 0,33% химически чистого кофеина. Рост кишечной палочки задерживается, тифозной палочки нет. 4) Агар с мал,ахитовой зеленью Ленца и Тица (Lentz, Tietz) (для тифа и паратифа); задерживает рост кишечной палочки и других щелочеобразователей, бацилы тифа и паратифа растут на 1-й день в виде мелких колоний, позже (2—3 дня)—хороший рост. Нейтральный 2—3%-ный агар с 2% пептона (рН—7—7,2) + водный раствор (1 : 60) Malachitgriin (Hochst} (1 см3 на 100 ем3). Количество краски устанавливается эмпирически для данного, агара. 5) Агар Падлевского: к 3%-ному мясопептонному агару (2% пептона) слабощелочной реакции прибавляют 1% химически чистого молочного сахара и 3% бычьей желчи (прокипяченной и профильтрованной). Стерилизация при 100° 2* дня по 30 мин. Отдельно' растворы: а) 1 %-ный- водный раствор кристаллической химически чистой малахитовой зелени (cryst. chem. pur. Hochst); б) 10%-ный водный раствор Natr. sulfurosi. На 100 см3 агара (расплавленного и остуженного до 60—70°) прибавляют 0,5 см3 раствора (а), 0,75—1,0 см3 раствора (б) и 0,5 см3 стерилизованной желчи. Желчь благоприятствует росту (обогащение) тифозной палочки; последняя, паратифозные и дизентерийные бацилы дают сначала бесцветные, затем золотистые колонии, Bact. coli—зеленые-колонии (разложение молочного сахара с образованием кислоты). 6) Chinabla u-M a 1 а-chitgrun-arap Биттера (Bitter) содержит 1% пептона Витте, 0,5% NaCl,.2% молочного сахара, 12%-ный раствор China-blau Hochst (8 капель на 100 см3) и малахитовую . зелень, кристаллическую, химически чистую (2,5 см3 0,1 %-ного раствора на 100).. Ji--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- Тиф и паратиф—бесцветные прозрачные колонии, Bact. coli—синие, Proteus и Руосуа-neus-—тоже бесцветные, но менее прозрачные. 7) Агар с конгорот Л и берма на и, А с е л я (Liebermann, Acel): на 100 см3 3 %-ного слабощелочного мясопептонного агара (1% пептона, 1% нутрозы, 0,5% NaCl) берется 1,5 г химически чистой лактозы и 30 см3 1%-ного водного раствора конгорот. Колонии тифа, паратифа, дизентерии и холерных банил—красные, Bact. coli-—черные. 8) Среда Ш м и ц a (Schmitz) — серум конгорот-агар, среда такого же состава, как предыдущая; серум-агар готовится из сыворотки и отвара кровяных сгустков (с бойни). Можно прибавить кофеин, который задерживает рост Bact. coli. На этой среде колонии тифа, паратифа, дизентерии (Shiga и Флекснер)—сухие, плоские, тёмнокрасные; Bact. coli—темносиние на красном фоне. Очень хорошая среда. 9) Среда Лефлер-Шустера (Schuster): Malachitgriin-Reinblau-Safranin-Agar: на 100 см3 агара—3 см3 бычьей желчи, 1 см3 0,2%-ного водного раствора сафранина (rein; Grubler), 3 см3 1%-ного водного раствора Reinblau doppelt konzentr. (Hochst), 3—4 см3 0,2%-ного водного раствора малахитовой зелени (Malachitgrim-Chlorzink-Doppelsalz; Hochst,). Среда-—лилово-голубая; тифозные палочки—голубые колонии, тонкие, неправильные, с металлическим оттенком, паратиф В—то же, паратиф А—круглые, прозрачные колонии, голубоватые, без металлического блеска, группа Гертнера и coli—розовые и красные колонии. 10) Среда Гаснера (Gassner) с вассерблау и метахромгельб [на 200 см3 агара 17,5,&м3 10%-ного раствора вассерблау (с 10 г лактозы) и 12,5 см3 2%-ного водного раствора метахромгельб]. Среда задерживает рост спороносных палочек и кокков, кишечная палочка—темно-синие колонии, тифозные и дизентерийные— желтые. 11) Среда Мюллера (Muller): элективная среда для тифозных бацил, содержит Eisen-Kalium-Tartrat, фенол, лактозу, железистосинеродиСтый калий, соду. Бацилы тифа—оранжевые колонии на коричневом фоне среды, Bact. coli—синие; Среда дает более показательные результаты, чем Эндо и Конради-Дригальского. 12) Среда с бриллиантовой зеленью (Brilliantgrun-agar): 1 л нейтрального мясо-пептонного агара, 8 ел»3 раствора бриллиантовой зелени 1 : 100, 13,2 см3 раствора пикриновой к-ты. Свежая среда задерживает рост Bact. coli. 13) Кофеиновый бульон Фиккера (для накопления тифозных бацил): 100 см3 мясного бульона (3% пептона)+ 0,6 г чистого кофеина, 0,7 см3 раствора кристаллвиолетт (1 : 1 000). Следующие среды являются диференциальны-мидля rpyrnibityph.—paratyph.— coli—dysenter , т. е. служат гл. обр. или исключительно для этой цели .14) Лакмусовая молочная' сыворотка Петрушки (Lackmusmolke Petruschky) (см. Молоко, молоко как питательная среда)-—одна из основных сред для дифе-ренциации бацил тифа, паратифа, coli и дизентерии. 15) Лакмусовая искусственная молочная сыворотка Зейца— ценная замена сыворотки Петрушки: 20 г химически чистой лактозы, 0,4 г глюкозы; .0,5 г двуосповного фосфорнокислого натрия, 1 з фосфорнокислого аммония, 2 г лимоннокислого натрия (трехосновного), 5 г NaCl, 0,05 г сухого пептона Витте, 0,25 г азолитмина (Kahlbaum), 1000 см3 дест. воды. 16) Лакмусовое молок о—см. Молоко, молоко как питательная среда. 17) Среда Барзико-в а I: в воде растворяется 1% нутрозы, 1% глюкозы, 0,5% NaCl и добавляется 10% лак^ мусовой настойки (Kahlbaum). Bact. coli и parat. дают покраснение, створаживание и газообразование; Bact. typh. и dysenter.— покраснение и помутнение, Вас. faecalis alcaligenes—голубое окрашивание. Для лучшего уловления газа в пробирки опускается поплавок. 18) Среда Барзикова II—такого же состава, но вместо глюкозы—лактоза; Bact. coli—такое же изменение, как I; typh. parat. и дизентерии—среду не изменяют. 19) М а н-н и т-н у т р о з а-л акмусовый раствор Д е р р а для диференциации бацил группы дизентерии. 20) Мальтоз а-н у т р о з а-лакмусовый раствор Геча (Hetsch), то же. 21) Среды Гиса (Hiss) с различными углеводами и лакмусовой настойкой (или другим индикатором)—см. Общие среды. 22) Двойной сахарный агар Рес-сел я (Russell): 100 г питат. агара, 0,1 г глюкозы, 1,0 г лактозы, лакмусовая настойка; рН— 7,3—7,4; для диференциации бактерий группы: a) Bact. coli разлагает оба сахара с к-той и газом; б) группа паратифов и энтерита раз-' лагает глюкозу с к-той и газом; не разлагает лактозы; в} тиф и дизентерия разлагают глюкозу без газа, не разлагают лактозы; г) группа гделочеобразователей не разлагает ни лактозы ни глюкозы; цвет не изменяется. 23) Н е й-т р а л ь р о т-б ульон Бессон а, Ранка и Сенеза (Besson, Ranque, Senez): 1 л мясной воды слабощелочной реакции, 4,0 г глюкозы и 3 см3 1 %-ного водного раствора неитральрота; среда разливается в пробирки с поплавками (Durham, Asch). 24) Среда Омелянского: обычный бульон + x/s% муравьинокислого натрия (проверить реакцию) и !/я% насыщенного водного раствора Neu-tralroth. Разливается в пробирки с поплавками. Стерилизация в текучем паре. Изменение среды под влиянием роста бактерий группы— см. среду Р)6тбергера (Rothberger). 25) Среда Ротберге,р а—агар с виноградным сахаром и нейтральротом: мясопептонный агар (0,75%-ный)Н-0,3%виноградн,сахараи1%вод-ного насыщенного на холоду (профильтрованного), неитральрота; Bact. coli—зеленая' флюоресценция , газ и обесцвечивание среды (желтая), тиф и дизентерия-—малиновая окраска среды, паратиф А—к-та и немного газа, среда малиновая, легкая флюоресценция, паратиф В— флюоресценция, газ, среда оранжевая; щело-чеобразователи не изменяют среды. 26) Г л и-ц е р и и-ф уксиновый бульон Штер-н a (Stern) для диференциации в группе паратифа В (Вас. Schottmulleri и Вас. enteritidis Gart-neri—покраснение через 3 дня как исключение, В. Breslau—покраснение, Bact. suipestifer— не изменяет). 27) Сыворотка с рамнозой Биттер-Вейгмана и Габса (Bitter-Weigmann, Habs) для диференциации бактерий группы паратифа; индикатор—метилрот, В. Breslau— среда красная (отщепляет от рамнозы больше кислот); В. Schottmulleri—среда желтая; то же В. enteritidis Gartneri и В. suipestifer. 28) Р а-мноза-эндо-агар для той же цели (рамноза, син.изодульцит).29) Лакмусовый молочный агар Дригальского для диференциации тифа, паратифа, дизентерии, Вас. faecalis alcaligenes—голуб, рост, coli—красный. у 13S IV. Среды для холерных вибрионов (opt. pH—7,0—7,4): 1) 1%-ная пептонная вода. 2) Кровяной агар Дьедонне (Dieudonne): 30 частей щелочной крови, 70 частей агара; содержит большое количество щелочных альбуминатов; вследствие этого создаются благоприятные условия для роста холерных вибрионов и задержки размножения других кишечных бактерий. Хорошо развиваются Вас. pyocyaneus и некоторые кокки, их легко отличить по виду колоний.—3) СредаМолдована (Moldovan): те же составные части, но в отношении 1 : 4 (10+40). 4) Агар Пилона (Pi Ion): 30 частей щелочной крови (сода) и 70 частей нейтрального агара. 5) Среда Кабешима (Kabeshima): агар с гемоглобиновыы экстрактом Пфейфера и углекислым натрием. 6) Г с-моглобиновый агар Эша (Esch.): 15 см3 нормального раствора едкого калия, 15 см3 дестклироваиной воды, 5 г гемоглобина, 170 ем3 нейтрального 3%-ного агара. 7) Щ е -лочная среда Krumwiede: яйца, кристаллический углекислый натрий, мясо-пептонный агар. 8) Среда Теруушии X и д a (Teruuchi, Hida): а) казеин-трипсин-пептонная 4—5%-ная вода, прекрасная среда для холерных вибрионов; б) агар с 4—5% казеин-трипсин-пептона, щелочной реакции; растут только холерные вибрионы. 9) Среда Аронсона (Н. Aronson); с фуксином и тростниковым сахаром, сильно щелочной реакции (Natr. carbon.), вследствие чего остальные бактерии (coli) почти не растут; тростниковый сахар благоприятствует росту холерных вибрионов. 10) Среда Гессе (Hesse) с малахитовой зеленью и тростниковым сахаром. 11) Среда Кодама и Такеда (Kodama, Takeda): пептонная вода с крахмалом (картофельным); предложена для диференциации вибрионов, дает недостаточно четкие результаты. 12) Желчная среда Оттоленги (Ottolenghi): на 100 см3 свежей бычьей желчи (фильтруется через бумагу) берется 3 см3 следующего раствора: 10 г углекислого натрия, 0,1 г азотнокислого калия (селитра), 100 см3 дест. воды. Стерилизация в автоклаве 20 мин. при 115°. Способ накопления для первого посева, очень хорошие результаты. 13) Минеральная среда К е м а л ь-М у х т а р а (Kemal-Moukthar): 0,8 г фосфорнокислого натрия, 0,4 г аспарагина, 0,6 г молочнокислого аммония, 0,5 г NaCl, 100 см3 дест. воды; при первом посеве из faeces холерный вибрион быстро (5—б часов) дает почти чистую культуру; другие кишечные микробы значительно отстают в росте. 14) Среда для индола Б у й в и -да (Bujwid)—см. Холера. V. Пи тательные среды для палочек Пфейфера. Палочки Пфейфера лучше всего растут на средах с кровью и на витаминовых средах; рН границы—6,2—7,6; opt.—7,0; opt. t° 37°. Рост через 18—24 часа в виде мелких колоний,«капли росы»; на среде Ле-винталя колонии слегка мутноватые. 1) Агар с 5% дефибринированной крови в чашках (2 дня «созреть»). 2) Агар Левинталя(с вареной кровью) (LeVinthal): 2%-ный мясопептонный агар, рН 7,3—7,'5, расплавленный и остуженный до 60°, смешива-/ ют в колбах (медленно) с 5% крови (стерильной дефибринированной человеческой, лошадиной и пр.). Среда кипятится на горелке с асбестовой сеткой (или в Коховском аппарате) не бо- лее 5 минут при 1 л и 8—10 минут при 2 л. Цвет агара темнеет. При начале закипания снять и повторить процедуру еще раз (не перегреть). Асептично профильтровать при 60° через вату или отсосать пипеткой прозрачный агар после отстаивания при 60°. Разлить по пробиркам столбиком. Перед употреблением скосить (на 1—2 мин. погрузить в кипящую воду). Хранится 2—3 недели. 3) Агар кровяной Пфейфер а—по поверхности готового косого агара (1—172%; рН—7,3—7,5) спускают или размазывают немного свежей, стерильной крови (контроль в термостате 24 часа). 4) Агар витаминовый Легру (Legroux): обычный агар с 5—10% кровяного экстракта (кровь, разбавленная в.4 раза физиологическим раствором, греется 15 минут при 80°, стерильно фильтруется и пропускается через свечу). 5) Шоколадный агар по Voges'y:,K кипящему агару прибавить 15% лошадиной или кроличьей крови, смешать и тотчас же снять с огня. Когда агар остынет до • 50—60°, тщательно разболтать темный осадок, разлить по чашкам или в пробирки (скосить). Среда Эвери (Avery); агар с олеиновокислым натрием (задерживает рост стрептококков и пневмококков): а) витаминовый 2%-ный агар (рН—7,0—7,2); б) 2%-ный водный раствор олеиновокислого натрия (стерилизуется в автоклаве); в) дефибринированная кровь человека или кролика (отсосать сыворотку и долить до первоначального объема фи-зиол. раствором или бульоном); г) к 94 см3 агдра (90°) прибавить 5 ом3 2%-ного раствора олеиновокислого натрия и 1 ом3 взвеси эритроцитов. VІ.   Для палочек коклюша (Bordet-Gengou). Растут на кровяных средах в виде очень маленьких беловатых колоний. 1) А г а р кровяной обычный. 2) Агар картофельный кровяной Борде-Жангу: а) 100 г нарезанного ломтями картофеля варится в 200 см3 глицериновой воды (4%) при 120° 30 мин.; жидкость отфильтровывается и отжимается через полотно; б) 5 г агара растворяют в 150 см3 0,6%-ного раствора NaCl. К 150 см3 агара (б) прибавляют 50 см3 жидкости (а), разливают в пробирки по 2—3 см3 и стерилизуют в автоклаве при 120°. Перед посевом (накануне) в каждую пробирку агара (расплавленного и охлажденного до 50°) прибавить 1,5^3 см3 дефибринированной крови человека или кролика. Осторбжно перемешать, охладить в косом положении, надеть резиновые колпачки и поставить на сутки при 37° для 'проверки. Рост через 24—48 часов (гемолиз). VІI.    Среды для менингококков; opt. t° 37°, ниже 22° не растут; строго в аэробных- условиях. Для первых генераций необходимы среды с кровью или другой белковой жидкостью. С 2—-3 генераций растут на обычных средах. 1) А с ц и т-б у л ь о н: 2—3 части бульона + 1 часть стерильной асцитич. жидкости, содержащей не менее 5 а альбуминов на 1 л; помутнение и образование небольшого нежного осадка на дне. К концу 3 суток нежная, хрупкая пленка. 2) Асци^-агар или серум-агар: агар расплавленный и остуженный+1/* объема асцитич. жидкости или сыворотки (3 +1)-3) А с ц и т-а г а р или серум-агар Цейсле-ра и Риделя (Zeissler, Riedel), то же +2% глюкозы к агару. 4) Кровяной асцит—■ мальтоза - агар — среда Зша (Esch): 60 см3 пептонного агара, 20 см3 стерильной де-фибринирован. крови барана, 10 ем3 асцитич. 1S8 жидкости, 1 г мальтозы, распущенной в 3 см3 бульона. Рост быстрый. 5) Агар в и т а м и-п'о в ы й: 500 г свежего бычьего сердца, 15 г пептона, 5 г NaCl, одно яйцо и 500 см3 водопроводной воды. Нагревание при темп., щадящей витамины, на голом огне или водяной бане при постоянном помешивании, пока цвет массы сделается бурым (68—-70°); жидкость процеживается через густое сито или сетку (не через холст, вату или бумагу, т. к. это задерживает витамины). Отдельно, растворяют 15 в агара в 500 см3 водопроводной воды, нагревают до 70° и добавляют к первой смеси. Стерилизация в автоклаве при од*юй атмосфере в течение 30 минут, затем оставить до следующего дня. Вынув из кастрюли застывшую массу, срезают нижнюю мутную часть с осадком. Прозрачную часть растворяют, разливают по пробиркам и стерилизуют в автоклаве. 6) Агар с чело веческой кровью (Ш отмюлле-ра) и с виноградным.сахаром (Цейелера и Риделя): мясопептонный агар (остуженный до 45°) + 20% стерильно взятой человеческой крови+ 2% виноградного сахара. Диференциальная среда для отличия от Micrococcus catarrhalis и Micrococcus pharyn-gitidis; колонии всех видов круглые, немного возвышенные, серо-фиолетового цвета; консистенция у менингококков напоминает густое картофельное шоре, у других колонии снимаются со среды целиком. 7) Агар кровяной обыкновенный 10%-ный. 8) А г а р г е-моглобиновый Кедровского; пропущенный через мясорубку человеческий послед настаивается сутки с 3—4 объемами воды, фильтруется через свечу. Фильтрат сливают аа со стерильным 2%-ным агаром. ,9) А г а р плацентарный Кучера (Ku'tscher): мацерация 500 з свежих пляцент в 1 л воды; прибавляют: 2,5% агара, 0,5% NaCl, 1% глюкозы, 2% нутрозы, 2% пептона Шапото. К 3 частям этого агара, слабо подщелоченного и стерилизованного, прибавляют 1 объем инактивиро-ванной (при 60°) бычьей сыворотки. 10) Б е й л и среды (Beily): а) гормонный аг ар: 15 г агара (тщательно промытого) растворить в1 л воды, остудить до 50-—60°, прибавить 500 г умеренно измельченного сердца или селезенки быка. Довести до кипения и варить на слабом огне 15—20 минут. Повторно профильтровать через редкое сито. Прибавить 10 г пептона и 5 г NaCl, предварительно растворенных в небольшом количестве дест. воды. Кипятить 5 мин. Установить рН=7,4—7,5 (Natr. carbon.). Несколько минут дать отстояться (в коническом собуде), прозрачную жидкость слить с осадка, разлить по пробиркам, стерилизовать дробно или в автоклаве 20 минут при 115° (большие бутылки стерилизовать 2 раза), б) Гормонная желатина: 10 г желатины (хорошей) растворяют в 1 л воды; в остальном—по предыдущему. в) Кровяной гормонный агар: обычный агар + 5% свежей дефибрини-рованной человеческой крови. Хорошая среда для сохранения культур; на косо застывшем агаре рост при 37° сутки, заливание жидким парафином, сохранение в косом положении на рассеянном свете в комнатной t°. Жизнеспособность сохраняется 3—12 месяцев. 11) Среда Вассермана (см. ниже среды для гонококков). 12) С р е д а мозговая: 1ч. воды + 2 части протертого через решето или сито мозга. Стерилизация при 100° 3 дня подряд. 13) Среда Сакепе и Делатера (Sacquepee, Delater). В Эрленмейер. колбе смешиваются белки 2 яиц, прибавляется тройное количество дест. воды и 0,5 (на 100) 10%-ного раствора едкого натрия. Стерилизация в автоклаве 15 мин. при 115°. Прибавить 1 часть этой жидкости к 5 ч1. стерильного нейтрального агара (55°) и разливать по чашкам. 14) Среда ММ (Салимбени и д Эреля): 1 л пептона Мартена (6—8-часовой); подщелачивание, осаждение нагреванием в автоклаве ,15 мин. при 120°. Фильтрование через бумажный фильтр, прибавление 2 г глюкозы, разливание и стерилизация в автоклаве 15 мин. при 112—115°. 15) С р еда Унгерман а-тсм. среды для простейших, N» 5. 16) Сыворотка Бухмана, модификация Лефлеровской сыворотки: 75 ч. сыворотки рогатого скота, 25 ч- бульона, 1% декстрозы с прибавкой нейтральрота (0,5 :10 000); рост в виде красных колоний. VІII. Среды для гонококков; opt. роста 36—37°. Границы 25-—40°. Реакция среды слабощелочная (рН — 7,3); пределы рН—6,0— 8,3. 1) Агар кровя tro й (1 ч. дефибрини-рованной крови+ 2 части питательного агара). 2) Асцит-агар поЛингельсгейму (Lingelsheim) для диференциации различных кокков. К 100 см3 асцит-агара прибавляют 15 см3 стерильного раствора лакмусовой настойки и 1 г декстрозы, мальтозы или левулезы (сахар растворяют в 10 ел»3 дест. воды и а/2'часа кипятят в аппарате Коха; по охлаждении прибавляют к асцит-агару) и разливают в чашки Петри (колонии гонококка бесцветные). 3) А с-цит-бульон (1 ч.+З ч.). 4) Лимоннокислый асцит-агар И к о м а (1со-та), асцит-агар с 0,4% и-лимонной кислоты. 5) Пептон-глицерин-асцит-агар nq Киферу (Kiefer): питательный агар (372% агара, 0,5% NaCl, 1%. пептона, 2% глицерина) + асцитич. жидкость аа (смешивается с остуженным до 40° агаром). 6) Вассермана среда: 15 см3 свиной сыворотки (или сыворотки другого животного), 30—50 см3 воды, 3 см3 глицерина, 0,8 г нутрозы (Caseinna-triumpho'sphat); кипятить 15 мин. при тщательном помешивании. Разлить по пробиркам и стерилизовать в текучем паре. Перед применением слить аа с 2%-ным стерильным агаром, растопленным и остуженным до 50—60°. Очень хорошая среда. 7) Среда Лебефа (Leboeuf): 4   л печоночного бульона, 400 см3 раствора яичного белка, 20 г картофельного крахмала (проверить нейтральность реакции), 20 г на 1   л агара; стерилизация 35 минут в автоклаве при 115°. Хорошая среда для приготовления вакцин. 8) Среда Настюкова: к мясопептонному агару, расплавленному и остуженному до 45е, добавить х/з яичных желтков, стерильно собранных и смешанных с тремя объемами стерилизованной воды. 9) Среда Ник о л я (Nicolle) для приготовления вакцины: 100 см3 мясного бульона, 0,4 г мочевины, 2 s чистой глюкозы, 0,05 г фосфорнокислого аммония, 1 г морской соли, 1,5 г агара. К готовой среде прибавить 0,5 см3 сыворотки кролика на 5 еж3 среды. 10) Среда Сабур о и Нуаре (Sabouraud, Noire): агар с молочной сывороткой, глюкозой и мочевиной; 1 л свежего молока кипятить 5 мин.; осадить казеин прибавлением 2 см3 НС1, пропустить через сито, покрытое гидрофильной ватой. Прибавить % объема воды, нейтрализовать 10%-ным раствором соды. Стерилизация в автоклаве 10 минут при 120°; фильтровать; прибавить 1% пептона, 1% глю- 13» козы или -сахарозы, 0,3% мочевины, 1,6% агара, распустить в автоклаве, фильтровать через бумагу. Разлить по пробиркам, стерилизовать 10 минут при 110°. 11) Сыворотка человеческая свернутая. IX.   Специальные среды для стрептококков; opt. t° 24—38°; рН границы— 5,5—870; opt. рН—6,2—7,0. 1) А г а р с кровью (10% бараньей крови). 2) Агар лактозный лакмусовый (колонии голубые). 3) 1%-ный бульон сахарный. 4) Серум-бульон Марморека: а) 1 часть свежеприготовленного щелочного (ок. 5 ем3 едкого натра на 1 л) бульона+2 части свежей человеческой сыворотки; б) 2 насти бульона+1 часть асцитич. жидкости; в) 1 часть бульона Мартена+ 1 часть человеч. сыворотки (инактивированной 30 мин. при 58°). 5) Среда обогащения Вейсенбаха (Weissen-bach): пептопная вода с глюкозой на яичном белке, щелочная; 100 см3 воды, 4 г пептона Ша-пото, 0,5 з NaCl; 0,2 г глюкозы, 100 см3 яичного белка (подщелоченного содой и разведенного в 3 раза дест. водой). 6) Бульон Альдерс-г о ф a (Aldershoff) для получения скарлатинозного токсина; 300 г мяса, 500 см3 дест. воды, 500 см3 0,8%-ного раствора соды, 5 ом3 хлороформа, 2 г панкреатина химически чистого (Merck), 80 см3 соляной к-ты (нормальной). Подробное приготовление—см. Стрептококки.—Диферен-циальные среды для различных видов стрептококков (haemol., anhaemolyt., viridans, Entero-cocc, Stf. mucosus и пр.)—см..соответствующие отделы. 7) Агар желчно-кровяной: а) 80 ел*3 3%-ного питательного агара (растопленного и остуженного до 50°); б) 10 см3 бычьей желчи (стерилизация 2 дня подряд по 20 мин. в аппарате Коха); в) 10 см3 дефибринированной крови барана. Перед смешиванием желчь нагревается до 45—50° (чашки Петри). 8) Агар с гретой кровью Билинга (Bieling): 3%-ный питательный агар (1% пептона), нагретый до кипения,+ 15% дефибринированной крови (барана или лошади), разлить по чашкам. 9) Агар сахарно-кровяной по Ковачу (Kovacs): 2%-ный сахарный агар + +дефибринированная баранья кровь 1 : 5(чашки Петри).10) СредаРымовича: обычный агар (рН—7,6)+1/3 объема дефибринированной и освобожденной от стромы лаковой крови голубя; отличие скарлатинозного стрептококка от других гемолитических стрептококков—растет на средах Рымовича в виде белых колоний без конденс'ации ЫЬ. 11) СредаСпанье (Spanier): сыворотки 1 часть, 2 части Aq. de-still., 0,2% эскулина, 8% лакмусовой настойки. При образовании кислот покраснение и выпадение белка. 12) Среда эскулино-вая Гаррисона и Вандербека (Harrison, Wanderbeck): 1,5 а пептона, 0,5 з Natrii taurocholici, 0,1 з эскулцна, 0,05е лимоннокислого железа на 100 см3 воды. При расцеплении эскулина—почернение среды. Энтерококк расщепляет эскулин, устойчив к желчи, не гемолизирует, рост его не задерживается желчью. 13) Эскулин-бульон Курт М е й е р а: об.ычный бульон+ 0,2% эскулина. Диференциация с энтерококком. X.   Среды для пневмококков. Границы рН—7,0—8,3; opt. рН—7,8. 1) Агар .пептонный с кровью (кролика или человека). 2) Агар кровяной Билинга: 20 см3 дест. воды, 40 см3 дефибринированной лошадиной" крови, 60 см3 агара; рН — 7,5. 3)   А г а-р Т. (Truche) :;такой же состав, как среда Т, (см. ниже)+ 20 з агара на 1 .л. После растворения агара—подщелочить до слабощелочной реакции. Не фильтруя, разливают по пробиркам, стерилизуют 20 минут при 110°. 4)   Серум-бульон Нейфельда щелочной реакции (5—10% сыворотки). Среда хороша для сохранения вирулентности. 5) Серум-агар Вексельбаума:1ч. серум+ 2 ч. агара. 6)СредаСалимбени ид'Эре-л я: мацерация свиных желудков (см. выше бульон Мартена) в течение 7—8 часов при 50°. При 55° прибавляют на 1 л 10 см3 НС1 и при встряхивании 300 г кашицы из ч желудков (пропущенной через мясорубку). Выдерживают 7—8 час. при 50° и затем поднимают t° до 80— 90° чтобы разрушить пепсин и остановить переваривание. Подщелачивают и стерилизуют при '120°. Фильтруют через смоченный бумажный фильтр (Chardin) и прибавляют 2 г глюкозы. Разливают, стерилизуют при 112—115°. Хорошая среда для сохранения пневмококков. 7) Среда Трюша жидкая (Truche): 4 з пептона Шапото, 0,5 з NaCl, 0,2 з глюкозы, 100 см3 дест. воды, растворяется при 80°; слегка подщелачивается (слабо розовое окрашивание по фенолфталеину). Кипятится 5 .минут, фильтруется, разливается, стерилизуется 1/i часа при 110°. Для первых культур хорошо прибавить х/з асцитической жидкости. Для сохранения вирулентности пневмококков прибавляется 2/з желатины (15%-ной), растворенной в физиол. растворе и подщелоченной (полужидкая среда). 8) С р е д aN. С. Т. (Nicolle, Cotoni, Truche): в 1 л жидкой среды Truche, нагретой на водяной бане, растворить 150 з желатины при 55°, прибавить белок яйца, подщелочить, нагревать ХД часа при 110°. Перед применением среда распускается в водяной бане. Культура засевается 1 часть на 2 части среды. Сохраняется на леднике (жизнеспособность и вирулентность держится несколько месяцев). 9) Среда Гентуна, L. A. P. (Huhtoon): 0,5% лактозы, 0,2% амноида, 0,1% пептона, 0,25% NaCl, 0,5% двуосновного фосфорнокислого калия, 0,03% одноосновного фосфорнокислого калия; смесь растворяется при кипячении в водопроводной воде. Лактоза растворяется в количестве 10—15% в дест. воде, стерилизуется и прибавляется к общей смеси> 10) Сыворотка Унгермана (Ungermann) (см. среды для спирохет) для поддержания длительности культур. И) Опт охи новый агар: а) ОД з ор-tochini hydrochlorici растворить при нагревании в 10 см3 Aq. destillat. (быстро разлагается); б) 1 еж3 раствора оптохина (1%-ного) прибавляется к 150 см3 2V2%-Horo агара; в) 60 см3 лошадиной крови смешивают с 90 ем3 стерильной дестилир. воды, выдерживают 1 час при 60°. Оптохиновый агар вливают в кровяную смесь, Осторожно смешивают. Рост пневмококков на этой среде задержан, стрептококков нет. 12) Серум-инулин-бульон Г и с а: 2 части питательного бульона+ 1 часть сыворотки; к 100 частям этой смеси прибавить 6 частей обыкновенного раствора лакмуса, в котором растворена при нагревании 1 часть инулина (1 + 5). Диференциация с пневмококками (к-та). 13) Среда Г и с с а:' 1 часть сыворотки быка, 2 части Aq. destillat.; к этому прибавляют 1% лакмусовой настойки (5%-ной); смесь нагревается до 100°, фильтруется, прибавляется 1% инулина. Дробная стерилизация при 100°. Диференциальная среда—пневмококк раз- лагает инулин (среда краснеет), стрептококк не изменяет ее (исключение иногда зеленый стрептококк). 14) Среда Саломона (Salomon) для диференцирования-с Str. mucosus и пневмококком (стрептококк разлагает растворимый крахмал, сахарозу, лактозу с образованием кислоты). К 10 см3 питательного агара (3%-ного), расплавленного и остуженного до 58d, прибавляют 1,5 см3 10%-ного раствора растворимого крахмала (в лакмусовой настойке) и затем 5 см3 свежей асцитической жидкости (инактивиро-ванной нагреванием в водяной бане 30 мин.). Разливают по чашкам. XI.  Среды для чумных бактерий: opt. t° 30—35°; рост возможен при-Ь5° (отличие от других патогенных бактерий); рН'границы—5,6—7,5; opt..pH—6,5—7. Рост на обычных средах. 1)Агар с солью: обычныймя-сопептонный arap + NaCl (2,5—5 на 100)—быстрое появление инволюционных форм. Дифе-ренциальная сре^а с бацилами псевдотуберкулеза грызунов. 2) Среда Гиммель-ф а р б а (см. Чума) для диференциации с чумными ба'шлами. 3) Среда Никаноро-в а : 100 см" ороженного бульона Мартена; 2 г агара в пор шке, 0,01 г крезолрот.. Бульон фильтруется ч /рез свечу. Смесь недолго кипятится, разливается в стерильные пробирки и остужается в косом положении. Цвет среды желто-оранжевый (рН—7). Краснеет через сутки при росте псевдотуберкулезных бацил (щелочение), бацилы чумы почти не изменяют через 24 часа. XII.   Среды для возбудителя ту"-ляремии. 1) Среда Френсиса (Francis): мясопептонный агар + 5% лошадиной сыворотки, 1 % глюкозы, 0,1 г цистина; или агар + + 1% глюкозы.+ 5% кроличьей крови; рН= =7,3; opt. роста—37°, колонии через 2—3 дня в виде капель росы, слизистые, плохо растирающиеся в физиол. растворе. 2)СредаМек-Коя и Чепина (Mac Coy, Chapin): смешивается яйцо (4 части) и 1 часть воды или молока или 3 части яичного желтка и 2 части физиол. раствора; смесь,свертывается в аппарате Коха, как обычно. XIII.     Среды для анаэробов—см. Микроорганизмы, культивирование микробов. Рост в условиях анаэробиоза, opt. 37°, рН— 6,0—7,б"для В. perfringens, рН—5,5—8,3, opt. 7,0—для В. tetani; в основу сред предпочтительно употреблять раствор пептона, приготовленного по способу Мартена. 1) Агар сахарно-кровяной Цейслера: слабощелочной агар (по лакмусу) с 2-—3% агара и 2% глюкозы растапливается и охлаждается до 45° (или в больших пробирках или же переливается в мерительный цилиндр); к нему прибавляется около 20% свежей дефибринированной крови (на 60 ом3 —12—15 т3), перемешивается и разливается в чашки Петри. Перед засевом чашки 2 дня выдерживаются при комнатной t°. 2) А г а р к р о в я н о и—-см. Кровь, кровь как питательная среда. 3)Бульонснейтраль-рот (1%).4) Бульон с ж'елчью (1:5). 5) Печоночн.ый бульон Кит т-Т а р о ц-ц и (Kitt-Tarozzi): а) в бульон (рН—7,4—7,6), разлитый в пробирки (8 см3), кладут по 2—3 кусочка свежей печонки весом 1—-3 г (морской свинки, кролика, теленка), стерилизуют в автоклаве 20 мин. при 110°; б) к печени, нарезанной кусочками, прибавляют троекратное количество питательного бульона и кипятят в Коховском аппарате 30 мин. Бульон фильтру- ют, кусочки промывают на сите водопроводной водой и распределяют по 3—4 кусочка по пробиркам (+7—8 см3 бульона). Стерилизация 30 мин. при 110°. 6) Бульон с кусочками мяса: свежее провернутое мясо раскладывается по пробиркам (около 3—4 г), заливается 8 см3 бульона (рН—7,4—7,6) и стерилизуется в автоклаве30мин. при 110°. 7) Бульон с кусочками вареного бел к а—см. Микроорганизмы, культивирование микробов (Taroz-zi, Noguchi). 8) Бульон кровяной Кит-т а: слабощелочной мясопептонный бульон с добавлением свежей стерильной крови человека, барана и пр. (3 см3 на пробирку). 9) Бульон «переброженный» Вюркера(Wurckei): бульон (750 см3) в колбе с мелкоизмельчен-ной печенью (250 г), простерилизованный в автоклаве, засевается чистой культурой Вас. putrificus Bienstock и ставится на 14 дней в термостат; затем стерилизуется под давлением, фильтруется через асбестовый фильтр, смешивается поровну со слабощелочным бульоном, разливается по пробиркам, стерилизуется. 10)  Мозговая кашица (Hibler): свежий, очищенный от оболочек мозг пропускается че-. рез мясорубку; на 2 части мозга прибавить 1 часть водопроводной воды (нейтральная реакция), пропустить через волосяное сито; 2 часа варить в аппарате Коха. Разлить по пробиркам (10 см3), стерилизовать в автоклаве 2 часа при 110°. На этой среде, так же как и на печоночном бульоне, анаэробы растут без особых мероприятий, преграждающих доступ воздуха; мозговая ткань обладает восстанавливающим действием. Среда имеет диференциальное значение, т. к. выделяющие H2S и щелочь анаэробы «чернят» среду (образование сернистого железа), а выделяющие кислоту окрашивают ее в розовый цвет. Среда пригодна для сохранения культур. 11)  Молоко с к у с о ч к ами п еч е н и по РуппертуиРотгардту (Ruppert, Rott-gardt), Кусочки свежей печени или почки (морской свинки) в 3—4 г кладутся в пробирки с 8 см3 коровьего молока, стерилизуются в ав- \ токлаве 60 мин. при 110°. 12) Лакмусовое м о л 0 к о—см. Молоко, молоко как питательная среда. 13) Пептонная вода 2%-ная. 14)  Среда с ватой Врублевского—см. Микроорганизмы, культивирование микробов. 15)  Среда Ногуши-Смита (Noguchi, Smith): асцитический бульон со стерильными кусочками свежей почки. У обескровленного кролика стерильно вырезается почка, стерильно разрезается на 8 частей, промывается физиол. раствором, раскладывается по стерильным пробиркам, доливается 8—10 см3 стерильного асцитического -бульона. Контроль стерильности 5—6 суток при 37°. После посева заливается стерильным вазелиновым маслом (1—2 см толщины). 16) Среда с цистеи-ном Фрея и Ридмюллера (Frei, Ried-milller): обыкновенный бульон из сердца или мяса рогатого скота или лошади + 1% пептона, 0,5% NaCI и 272% агара; рН—7,4. К расплавленному агару (70°) прибавл. 1% 0,015%-ного солянокислого цистеина; 10%-ный раствор NaOH до рН = 7,4. Стерилизация 1/23Д часа в ■ текучем паре. Рост возможен в аэробных условиях. 17) Среда Wilso n'a и Мае V. В 1 а-' i г'а: 100 см3 3%-ного сахарного (глюкоза) агара, 10 см3 20%-ного раствор'а, свеже приготовленного на дестшпф. воде сернистокислого натрия и 1' см3 8%-ного раствора хлорного железа. От восстановления некоторыми анаэро- бами (Вас. fallax, B. perfringens, септич. вибрион, Вас. Chauvoei, B. sporogenes) сернисто-кислого натрця происходит соединение сульфида натрия с хлорным железом и образование черного осадка сернистого железа. Углеводные среды (для изучения брожения). 18) Лакмусовый бульон с углеводами: питательный бульон (рН—7,2)+ 7,5% лакмусовой настойки и 1 % углеводов (глицерина, маннита, изодульцита, глюкозы, галактозы, левулезы, сахарозы, лактозы, мальтозы, инулина, салицина). 19) У г л е в о д ы на 2%-ной пептон н ой воде готовятся в виде основных растворов: 30% сахарозы, 30% глюкозы, 17% лактозы, 30% мальтозы, 15%. маннита, 30% левулезы (не стерилизовать); 30% галактозы, 14% раффинозы, 30% глицерина, 30% дульцита, 30% арабинозы, 15% ксилозы, 30% декстрина, 15% рамнозы (изодульцит), растворить при нагревании (на сетке), профильтровать через бумагу, разлить по ампулам, запаять, стерилизовать 15 мин. при 110°. Прибавлять в каждую пробирку с 2%-ной пептон-ной водой перед посевом по 5 капель основного раствора. Результат брожения определяется прибавлением после роста 2—3 капель лакмусовой настойки в каждую пробирку. XIV.  Среды для патогенных грибков. 1) Среда Сабуро для выделения (Milieu d 'epreuve de Sabouraud): 1 000 см3 воды, 18 з агара, 40 г мальтозы (brute de Chanut), 10 е пептона (granulee de Chassaing). Отдельно разварить в течение 1/а часа агар в воде и отдельно растворить в воде пептон и мальтозу. Смешать, поставить в автоклав, нагреть до 120°, вынуть из автоклава, фильтровать горячим через фильтр Шардена, разлить. Стерилизовать, как указано выше. 2) Среда Сабуро для сохранения (Milieu de conservation de Sab.ou-raud): 1,8% агара, 1% пептона, 1 000 см3 воды. Приготовление, как предыдущей. 3) Среда Сабуро для споротрихов: 10 г агара, 10 з пептона Шапото, 40 г глюкозы, 1 000 см3 воды. Культивирование при комнатной t°; opt. 22—30°. 4) Среда Плаута (Plaut) для,, исходной культуры: 1—2 г пептона, 1 г глюкозы, 0,5 г глицерина, 2 г агара, 0,5'г NaCl, 100 см3 воды. Нейтрализация не производится. 5) Среда Грюца (Grutz): 5 г пептона Кноля (растворяется в нескольких см3 воды при легком нагревании), 10 г глюкозы, 5 г глицерина, 5 г NaCl, 1 000 см3 1,8 %-ного агара. 6) Среда для сохранения Грюца: 30 г пептона, 1 000 см3 1,8 %-ного агара. Выращивание патогенных грибков производится в комнатной t°, не закрывая резиновыми колпачками, на рассеянном свету. XV.    Среды для пр остейших—см. Микроорганизмы, культивирование простейших. А. Спирохеты. Спирохеты растут в условиях относительного анаэробиоза. 1) Л с-цит-агар Ногуши для бледной спирохеты, спир. Обермейера, Sp. gallinarum, Sp. icteroge-nes: 2 части слабощелочного 2 %-ного агара+ + 1 часть асцита или жидкости hydrocele. Разливается в пробирки по 15 см3, в каждую вносится кусочек свежего органа кролика (почки, яичка), сверху заливается слоем жидкого парафина высотой в 3 см (асцитическая жидкость не должна содержать желчь). 2) Среда Ари-стовского и Хольтцера (для бледной спирохеты): сыворотка кролика (неразведен-ная или разведенная физиол. раствором 1 : 2), инактивированная 1час при 60°,с кусочком све- жего яичка или мозга. (Вместо сыворотки кролика можно взять асцитическую жидкость ил» человеческую сыворотку.) 3) Среда с кровяным экстрактом: а) сгустки крови лошади протереть через сито, прибавить при нагревании двойной объем физиол. раствора NaCl (8%0); б) нагревать до 75° в течение 15—20 минут,.фильтровать через бумагу, затем через свечу Шамберлана Ьз., прибавить немного стерильной сыворотки кролика (5%), стерилизовать дробно 3 дня подряд при 56° по 30 минут (среда для Sp. icterohaemorrhag., спирохеты б-ни Вей-ля). 4) Среда Н.огуши (для различных кровяных спирохет): 80 ел3 стерильного физиол.' раствора, 10 см3 сыворотки кролика,. свежей и стерильной, 10 см3 2%-ного мясопептонного; агара (рН—7,2), распущенного и остуженного до 95°, 0,5 см3 стерильного раствора НЬ. Застывает столбиком. После засева покрыть слоем вазелинового масла. 5) С р е д а У н г е р м а н а. (Ungermann): стерильная свежая сыворотка (кро'лика), разбавленная небольшим количеством физиол. раствора или жидкости Рингера, разливается по пробиркам, нагревается У2 часа при 58—60° и заливается от доступа воздуха стерильным парафином (для культивирования спирохет icterogenes, Obermeieri, Duttoni).. 6) СредаШерешевского (для бледной спирохеты): свернутая ..лошадиная сыворотка (на водяной бане при медленном поднятии температуры до 70°) столбиком. 7) Сывороточная вода Ногуши (для бледной спирохеты): 1 часть сыворотки кролика+ 3 части дест. воды; к смеси прибавляется кусочек почки или яичка. Заливается парафином,по предыдущему. 8) Сыворотка водная Уленгута (TJhlen-huth) для спирохеты icterogenes: смешивается стерильная сыворотка кролика и водопроводная вода в отношении 1 : 30. После засева покрыть слоем парафина. 9) Сыворотка лошадиная Шмамина (Chmamine)для бледной сцирохеты: к 200 см3 лошадиной сыворотки прибавляется при покачивании сосуда 1—1,5 г ну-клеиновокислого натрия. Пропускается С02(и» аппарата Киппа) в течение 2—3 минут—достигается прозрачность среды. Сыворотка разливается высоким слоем в пробирках, нагреваемся 3 дня по 1 часу при 60° и 4-й медленно до 70°. 10) Сыворотка лошадиная Хата (На-ta) для спирохет Обермейера: свежая лошади-над, сыворотка разливается в пробирки (15— 17 мм ширины) по 4 см3; в каждую прибавляется 8 см3 физиол. раствора и смешивается. Затем пробирки выдерживаются в водяной бане-3 часа при 58°; медленно поднимают t° до 70— ,71°, держат 1/2 часа при 7Г. В полутвердую сыворотку кладут по маленькому кусочку почки кролика. Засев в» глубину. Б. Амебы. 1) Настой и отвар соломы. 2) Желатина Мутона (Mouton): 900 см3 слабощелочной воды, 100 см3 обычного питательного бульона, 2D г желатины. 3) А г а р Шардингера: 30 г сена+1 л воды, прибавить 1—1,5 г гидрата извести в порошке-, на 24—36 час. в термостат; фильтрование, подще-лачивание. Прибавление 1—2у2%-ного1 агара. Засевание материала в конденсационную воду. 4)  Агар Ф.роша: 0,5 г агара, 90 см3 водо-проз. воды, 10 см3 слабощелочн. питат. бульона. 5) Агар Мусгрева и Клегга (Musgrave, Clegg): 20 г агара, 1 000 см3 дест. воды, 0»3—0,5 г мясного-экстракта, 0,3 — 0,5 г NaCl. Слегка подщелочить едким натром. Патогенные амебы. культивируются на белковых средах. 14в В. Ж г у.т иковые простейшие. 1)  Среда Мек Нилаи Нови (Mac Neal, Novy): 2 части дефибринированной крови кролика и 1 часть агара. Рост в конденсационной воде. 2) N N N—а гар Николя (Nicolle)— модификация предыдущего: 900 езк* дест. воды, 14 г агар-агара, 60 г NaCl. При t° 43° прибавляют дефибринированную кровь кролика в отношении 1:2. 3) Жидкая среда Лаве рана и Пти (Laveran, Petit): 2 г пептона Ша-пото, 6 г NaCl, 900 см3 дест. воды. Эта пеп-тонная вода смешивается поровну с дефибринированной кроличьей кровью. 4) Кровяной агар Неллера (Noller): 25 г агара, 20 г глюкозы, 1 000 еж3 слабощелочного лошадиного бульона. Разливается в пробирки. Перед прибавлением крови к растопленному агару приливается равный или половинный объем дефибринированной крови лошади, и среда оставляется для застывания в косом положении. Регенерация агара имеет целью освежение уже использованного агара (из экономических целей). При регенерации принимаются во внимание следующие пункты: 1) бактерии и продукты их обмена должны быть удалены; 2) потребленные питательные вещества должны быть возмещены; 3) специально прибавленные вещества (индикаторы и пр.Xдолжны быть удалены .—Регенерация простого агара производится следующим образом: агар стерилизуется, сливается в кастрюли, оставляется до застывания. После застывания вынимается целиком, срезается нижняя мутная часть, остальная масса агара разрезается на кусочки и промывается в текучей воде 1 сутки и более. 1) На 60 л промытого агара прибавляется 15 л мясной воды, 15 л жидкого пептона, 600 г сухого агара, 150 в NaCl. 2) К 1 л регенерируемого агара пда-бав'ляют 500 см3 дест. воды, смесь распускается на огне. На 1 л исходной среды прибавляют 3 смг 10%-ного раствора соды, кипятят.У2 часа для стерилизации. Прибавляют затем 20 г животного угля на 1 л среды и еще полчаса кипятят; среда просветляется вследствие поглощения бактерий углем. Дать остыть до 50—60°, прибавить 30 еж3 сыворотки (вместо яичного белка). Вместо растворов пептона и Либиховского экстракта можно прибавить на 1 л регенерируемой среды у2 л обыкновенного бульона или бульона Готтингера. 3) Регенерация агара; по методу Контрольного ин-та. Использованный агар стерилизуют в автоклаве 20 мин. при 125°, сливают в низкую широкую кастрюлю, остуживают и режут на мелкие куски; последние кладут на решето и ставят под струей проточной воды на 18—24 часа. Затем растапливают, проверяют и устанавливают реакциюпо лакмус.. бумажке, измеряют объем и добавляют в размере 7з этого объема нейтрального бульона и на общее количество—2,5% сухого агар-агара. Перед стерилизацией прибавляют белок (1—2 на литр) и ставят на 20 мин. в автоклав при t°\ 120° (белок перед прибавлением размешать в небольшом количестве дестилированной воды). Фильтруют, разливают по пробиркам и стерилизуют при 120е. Лит.: Абрамове, Бактериологическая методика, М., 1927; В е й н б е р г М. и Г и н з б у р г- В., Анаэробные микробы и их роль в патологий, М., 1928; К а л ь -меттА., Нзгр Л. и Б о к э А., Руководство по микробиологической и серологической технике,Москва—JJ., 1928; Розен П., Практическое руководство но бактериологической технике, М.—Л., 1931; Handbuch der mik-roblologischen Technik, hrsg. v. R. Kraus u. P. Uhlen-buth, B. I—III, В.—Wien, 1923—24; Handbuch der pa- thogenen Mikroorganisrnen, hrsg. v. W. Kolle, R. Kraus-u. P. TJiilenhuth, B. IX—X, Jena—В.—Wien, 1929—30 (лит.); Kahlfeld-Walilich, Bakteriologische-Nahrtoden-Technik, В., 1929.                        А. Тогунова.

Большая медицинская энциклопедия. 1970.

Смотреть что такое "ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ" в других словарях:

  • ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ — жидкие или твердые смеси веществ, на которых выращивают микроорганизмы в лабораторных или промышленных условиях. Содержат соединения, служащие источниками углерода, азота, фосфора, витаминов и других компонентов, необходимых для жизнедеятельности …   Большой Энциклопедический словарь

  • питательные среды — жидкие или твёрдые смеси веществ, на которых выращивают микроорганизмы в лабораторных или промышленных условиях. Содержат соединения, служащие источниками углерода, азота, фосфора, витаминов и других компонентов, необходимых для жизнедеятельности …   Энциклопедический словарь

  • ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ — среды, на которых выращивают живые организмы (напр., для водных культур высших растений). П. с. бывают: естественные, для бактерий и грибов (картофель, молоко и др.); искусственные для культур бактерий и грибов (мясопептонный бульон, желатин и др …   Словарь ботанических терминов

  • Питательные среды —         жидкие или плотные среды, применяемые для выращивания в лабораторных или промышленных условиях бактерий, дрожжей, микроскопических грибов, водорослей, простейших, вирусов и культур растительных или животных клеток. Синтетические П. с.… …   Большая советская энциклопедия

  • ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ — жидкие или твёрдые смеси в в, на к рых выращивают микроорганизмы в лаб. или пром. условиях. Содержат соед., служащие источниками углерода, азота, фосфора, витаминов и др. компонентов, необходимых для жизнедеятельности микробов …   Естествознание. Энциклопедический словарь

  • Питательные среды бактериологические — жидкие, полужидкие или плотные субстраты, используемые для выращивания микроорганизмов в лабораторных или производственных условиях. Используют для выделения чистых к р бактерий, грибов и простейших из биогенных или абиогенных объектов, для… …   Словарь микробиологии

  • Питательные среды для бактерий — Под этим именем подразумевают различного рода субстраты, приготовляемые для изучения жизнедеятельности микроорганизмов при определенных условиях, изменяемых по воле экспериментатора. Микрохимические анализы и опыты искусственной культуры выяснили …   Энциклопедический словарь Ф.А. Брокгауза и И.А. Ефрона

  • питательные среды Гисса — см. Гисса среды …   Большой медицинский словарь

  • питательные среды Дифко — см. Среды Дифко …   Большой медицинский словарь

  • питательные среды Лифсона — см. Лифсона среды …   Большой медицинский словарь

Книги



Поделиться ссылкой на выделенное

Прямая ссылка:
Нажмите правой клавишей мыши и выберите «Копировать ссылку»

We are using cookies for the best presentation of our site. Continuing to use this site, you agree with this.